Title:
Evaluation of immunomodulatory and anticancer activities of autumn mandrake : Mandragora autumnalis : an in vitro and in vivo study / by Asma Ismail Mahmod ; supervised by Prof. Dr. Wamidh H. Talib. تقييم الفعاليات المحفزة للمناعة و المضادة للسرطان لليبروح الخريفي : Mandragora autumnalis دراسة خارج و داخل الجسم
تقييم الفعاليات المحفزة للمناعة و المضادة للسرطان لليبروح الخريفي : Mandragora autumnalis دراسة خارج و داخل الجسم تقييم الفعاليات المحفزة للمناعة و المضادة للسرطان لليبروح الخريفي : Mandragora autumnalis دراسة خارج و داخل الجسم
Author:
Mahmod, Asma Ismail, author.
Talib,Wamidh H, supervisor.
The Applied Science Private University (Amman, Jordan). Faculty of Pharmacy. Department of Clinical Pharmacy & Therapeutics.
General Notes:
Thesis (M. Sc. in Pharmaceutical Science)--The Applied Science Private University (Amman, Jordan), Faculty of Pharmacy, Department of Clinical Pharmacy & Therapeutics
, 2020.
Includes bibliographical references and index.
Background : The activity of phytochemicals has a huge impact on pharmaceutical research and on the process of developing new drugs. Hence, numerous studies have been conducted to investigate the efficacy of different natural products and their potential to be used in different types of therapy. For many centuries Mandrake species have been used as a powerful herbal medicine. Although many studies have shown the chemical compositions of Mandragora autumnalis, there is no research indicating its anticancer and immunomodulatory effects. Aim: The present study aims to investigate and evaluate the potential immunomodulatory and anti-tumor activity of ethanol crude extract and its solvent fractions obtained from Mandragora autumnalis leaves. Methods: Ethanol crude extract was prepared by maceration method then followed by solvents fractionation using n-hexane, aqueous/methanol, and water. Qualitative phytochemical tests were conducted to determine the presence of various secondary metabolites. Also, a quantitative analysis of ethanol extract by GC/MS spectrometry was carried out. MTT assay was applied to detect the antiproliferative activity of the crude extract and each solvent fraction against different cancer cell lines. Caspase-3 ELISA assay and VEGF ELISA kit were used to determine the
XXI
effect of ethanol crude extract and n-hexane fraction on inducing apoptosis and inhibiting angiogenesis. The in vivo model of the study included the following: acute toxicity assay to determine the LD₅₀ of M. autumnalis ethanol extract, then inoculation of Balb/C mice with EMT6/P breast cancer cells and treated with the ethanol extract. The changes in tumor size and survival rates were measured. Immunomodulatory activity was also evaluated by measuring the effect ethanol extract and its solvent fractions on splenocytes proliferation in the presence and absence of mitogens. Nitro blue tetrazolium assay and neutral red method have been used to determine the effect of each extract on the phagocytic activity of macrophages and the function of pinocytosis, respectively.
Results: Mandragora autumnalis extracts have shown high potency of inhibiting cancer cell proliferation. Both ethanol crude extract and n-hexane fraction were exhibited the most potent activity against all cancer cell lines and this may be due to their ability to reduce the expression of VEGF and the induction of apoptosis. On the other hand, ethanol extract was able to reduce tumor size in EMT6/P bearing mice, and cured 30% of the treated mice. Regarding the immunoassays, ethanol extract followed by aqueous fraction have significantly increased lymphocyte proliferation and phagocytosis activity of macrophages. The increase of pinocytosis activity was mainly achieved by ethanol extract and n-hexane fraction. However, all the significant results of the ethanol crude extract and its solvent fractions appeared to be following dose dependent manner. Conclusion: The results indicate that M. autumnalis has valuable activity against cancer cells and act as a stimulator of the immune system. However, further molecular investigation is required to understand the mechanism of action for M. autumnalis activity.
إن لنشاط المواد الكيميائية النباتية تأثير كبير على البحوث الصيدلانية وعملية تطوير عقاقير جديدة. وبالتالي ، تم إجراء
العديد من الدراسات للتأكد من فعالية المنتجات الطبيعية المختلفة وإمكانية استخدامها في أنواع مختلفة من العلاج. لعدة قرون
، تم استخدام أنواع Mandragora كدواء عشبي قوي. على الرغم من أن العديد من الدراسات أظهرت المكونات النباتية
الكيميائية لليبروح الخريفي ، لكن لا يوجد بحث يشير إلى آثاره المضادة للسرطان والتأثيرات المناعية.
الهدف من الدراسة: تهدف دراستنا إلى تقييم و تحديد النشاط المضاد للورم والنشاط المناعي المحتمل لمستخلصات مختلفة تم
الحصول عليها من اليبروح الخريفي.
الطرق و المواد المستخدمة: تم تحضير اربع مستخلصات مختلفة من اوراق اليبروح الخريفي وأجريت اختبارات كيميائية
نباتية نوعية لتحديد وجود المستقلبات الثانوية المختلفة. أيضا ، تم إجراء تحليل كمي لمستخلص الإيثانول بواسطة مطياف
GC / MS . تم تطبيق فحص MTT للكشف عن النشاط المضاد للتكاثر لكل مستخلص ضد انواع مختلفة من الخلايا
السرطانية. تم استخدام اختبار Caspase 3 ELISA لتقييم تحريض الاستماتة لأكثر المستخلصات فاعلية. علاوة على ذلك ،
تم قياس كمية عامل نمو بطانة الأوعية الدموية ) VEGF ( بعد اضافة المستخلصات الأكثر فعالية باستخدام مجموعة VEGF ELISA . تم تلقيح فئران Balb / C بخلايا سرطان الثدي EMT6 / P وعولجت بمستخلص إيثانولي ثم أخذت قياسات
التغيير في حجم الورم ومعدلات الشفاء للفئران المعالجة. تم تقييم النشاط المناعي من خلال قياس تأثير كل مستخلص على
تكاثر الخلايا اللمفاوية المناعية باستخدام اختبار التكاثر بالمحفزات. ثم تم تطبيق فحوصات ال نيترو بلو تترازوليوم و الصبغة
الحمراء لتحديد تأثير كل مستخلص على النشاط البلعمى للبلاعم ووظيفة الشرب الخلوي، على التوالي.
XXIII
النتائج: كشفت المستخلصات النباتية لليبروح الخريفي فعالية عالية في تثبيط تكاثر الخلايا السرطانية حيث أظهرا كل من
مستخلص الإيثانول و الهكسان فعالية عالية ضد جميع انواع الخلايا السرطانية المستخدمة في هذه الدراسة. و اظهر اختبار
تأثير المستخلصات على تركيز ال VEGF قدرة مستخلص الإيثانول متبوعًا بمستخلص n-hexane على تقليل افراز هذه
المادة، بالإضافة الى قدرة هذين المستخلصين على تحفيز الموت المبرمج للخلايا السرطانية. من ناحية أخرى ، كان
مستخلص الإيثانول قادرًا على تقليل حجم الورم في الفئران الحاملة لخلايا الثدي السرطانية نوع EMT6 / P ٪ ، وعلاج 02
من مجموع الفئران الخاضعة للإختبار. فيما يتعلق بتأثير مستخلصات النبتة على فعاليات الجهاز المناعي ، فإن المستخلص
الإيثانولي متبوعًا بالمستخلصات المائية قد زاد بشكل كبير من انتشار الخلايا الليمفاوية ونشاط البلعمة من خلايا الجهاز
المناعي. بالإضافة الى زيادة نشاط ال pinocytosis بشكل أساسي عن طريق الإيثانول وخلاصة n-hexane . و قد لوحظ
من خلال هذه الدراسة ان فعالية مسخلصات اليبروح الخريفي تعتمد على تركيز الجرعة المستخدمة فتزداد الفعالية بزيادة
التركيز.
الخلاصة: تشير النتائج إلى أن اليبروح الخريفي له فعالية واضحة ضد الخلايا السرطانية ومحفز للجهازالمناعي. ومع ذلك ،
هناك حاجة إلى مزيد من التحقيق الجزيئي لفهم آلية العمل لنشاط اليبروح الخريفي.
The electronic version is available in theses database \\ University of Jordan.
Includes abstracts in Arabic and English.
Subject:
Pharmacology
Cancer -- Treatment.
Cancer -- Immunotherapy.
Cancer -- Alternative treatment
Dissertation Note:
Thesis (M. Sc. in Pharmaceutical Science)--The Applied Science Private University (Amman, Jordan), Faculty of Pharmacy, Department of Clinical Pharmacy & Therapeutics
, 2020.
Physical Description:
1CD-ROM : PDF.
Publication Date:
2020.
Log in
Help
